高效液相色譜儀常見故障及解決方案

　　液相色譜儀在使用的過程中，可能會出現(xiàn)的故障：

　　1、流動相脫氣不充分；

　　2、流動相供給不暢；

　　3、流動相和貯液器被污染。

　　解決方案：

　　1、流動相脫氣不充分，對流動相進行再脫氣，采用更有效的脫氣方法（如通氮氣保護）或兩種方法配合使用，改變系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外低壓預(yù)混合。

　　2、流動相供給不暢，可能的原因是流動相已接近用完，管路吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)，應(yīng)經(jīng)常觀察貯液器中流動相的量，加足流動相的量保證所有的樣品分析完畢；輸液管路上安裝沉子沉至瓶底，貯液器蓋上留一小孔正好夾住進液管，使其不能上下移動；過濾器阻塞會引起管道和泵腔空化，也會使壓力不穩(wěn)；當(dāng)過濾器被微粒所阻塞或長霉時，去掉過濾器后系統(tǒng)會運轉(zhuǎn)正常，換上新過濾器即可；如果換上新過濾器仍然不暢，那就需要檢查流動相的制備過程，或者換大孔徑的過濾器，流動相都要重新過濾。流速過高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于過濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。出現(xiàn)這種情況時，可嘗試用下列方法解決：

　　1）改用低流速；

　　2）換大孔徑的過濾器；

　　3）增加進液管路內(nèi)徑；

　　4）抬高或加壓貯液器；

　　5）臨時不用入口過濾器（流動相確保做好過濾）；

　　其它問題，包括滲漏或接頭松動、低壓混合器過濾器阻塞、泵部件損壞（密封墊等），都能引起流動相供液不正常，注意檢查排除。

　　3、貯液器或流動相被污染，會出現(xiàn)一些問題：產(chǎn)生有規(guī)則的噪音增大、檢測器基線上升等現(xiàn)象。流動相中的污染物可能會被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而后再以穩(wěn)定的濃度流出來，所以在色譜圖中不出多余的峰。

　　不干凈的貯液器會污染清潔的流動相，每種流動相要備有專用的貯液器，或者定期報廢貯液器，都是良好的工作習(xí)慣。流動相污染源來自這幾個方面：試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格，微生物的影響，配制流動相時操作不當(dāng)?shù)?，因此要求用高純度化學(xué)試劑和HPLC級溶劑，一旦發(fā)現(xiàn)試劑有問題應(yīng)堅決報廢掉。

　　玻璃器皿應(yīng)按規(guī)定清洗干凈，為防止生長微生物，每天要按前述的方法清洗系統(tǒng)；懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長了微生物時，可用稀硝酸沖洗(注意不要損壞柱和管路系統(tǒng))，在緩沖液內(nèi)加生長抑制劑（0.04%疊氮鈉）或冷藏緩沖液；每天用0.2μm的過濾器過濾緩沖液，也會有效地防止微生物污染系統(tǒng)；真空脫氣時要防止泵油帶入流動相；應(yīng)該用清潔的惰性塞子、攪捧、過濾器和玻璃器皿配制流動相；已經(jīng)污染的色譜儀流動相一定要廢棄掉。